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Cloning the construct HVA1 into a binary vector by Gateway multisite System and genetic transformation of faba bean (Vicia faba L.) with HVA1 gene for improving drought tolerance

RĂ©fĂ©rence: 
AL AWAMIA (MA) ISSN: 0572-2721 , (2013), no 127 , p. 3-20
Auteurs: 
ABDELWAHD, R. (INRA, Rabat (Ma) centre RĂ©gional de la Recherche Agronomique de Rabat) E-mail:rabhaab@yahoo.fr; Gan, Q. (IOWA State University, Ames IOWA (USA)) Udupa, S.M. (ICARDA, Alep (Syrie)) E-mail:S.UDUPA@CGIAR.ORG; Diria, G. (INRA, Rabat (Ma) cen
AnnĂ©e: 
2012
RĂ©sumĂ©: 

Transformation par Agrobacterium tumefaciens est la méthode préférée pour la transformation des légumineuses. Communément, les gènes transférés par cette technique sont clonés entre les frontières gauche et droite d'ADN-T (Transferred-DNA) des vecteurs binaires qui se répliquent à la fois dans E. coli et Agrobacterium. Dans cette étude, le nouveau protocole de clonage des gènes 'intérêts "Gateway multisite System" a été utilisé pour insérer une nouvelle construction contenant la séquence HVA1, le promoteur double virus de la mosaïque du chou-fleur (CaMV) 2x35S et le terminateur Nos dans un vecteur binaire pTF101.GW3. Le vecteur binaire généré pTFGat101.11 contenant la construction de gène HVA1 a été ensuite introduit dans la souche A. tumefaciens EHA101. En utilisant le protocole de transformation basé sur l'organogenèse directe à partir des nœuds otylédonaires, nous avons réussi à obtenir 2% des pousses transgéniques de fève qui intègrent la construction de HVA1. Cette intégration a été confirmée par PCR de gène marqueur bar.

Texte intĂ©gral: 
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